移動相の吸光度

Topic LCI-USG-0021, 最終更新日 11/21/2024

以下の表を参照して、よく使用される移動相の複数の波長に対する吸光度を確認してください。

ベースラインノイズを低減するには、移動相を慎重に選択します。

最適な移動相とは、測定に用いる波長に対して透明なものです。そのような移動相を使用すると、すべての吸光度はサンプルの物性のみに起因したものとなります。また移動相の吸光度の影響として、「オートゼロ」機能で排除される吸光度の量だけ、検出器のダイナミックレンジの直線性も低下します。吸光度には、移動相の波長、pH、および濃度が関与します。いくつかの移動相の例が下表に示されています。ここで、吸光度は光路長 10 mm に基づいています。

注: 順相溶媒を使用する場合は、システムに適した Waters のヘキサン/THF 適合キットを取り付けます（ Waters ヘキサン/THF 適合キットを参照）。

注意: Alliance iS Bio HPLC System を pH 10 を超えて稼働する場合、オプションの高 pH キットを使用していることを確認します。さらにサポートが必要な場合は、Waters までご連絡ください。

表 1. 空気または水に対して測定した移動相の吸光度
移動相	指定された波長 (nm) での吸光度 (AU)
移動相	200	205	210	215	220	230	240	250	260	280
溶媒
ACN	0.05	0.03	0.02	0.01	0.01	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a
IPA	1.80	0.68	0.34	0.24	0.19	0.08	0.04	0.03	0.02	0.02
MeOH（脱気済み）	1.91	0.76	0.35	0.21	0.15	0.06	0.02	<0.01	n/a	n/a
MeOH（未脱気）	2.06	1.00	0.53	0.37	0.24	0.11	0.05	0.02	<0.01	n/a
安定化されていない THF（新しい）	2.44	2.57	2.31	1.80	1.54	0.94	0.42	0.21	0.09	0.05
安定化されていない THF（古い）	>2.5	>2.5	>2.5	>2.5	>2.5	>2.5	>2.5	>2.5	2.5	1.45
酸および塩基
酢酸、1%	2.61	2.63	2.61	2.43	2.17	0.87	0.14	0.01	<0.01	n/a
リン酸二アンモニウム、50 mM	1.85	0.67	0.15	0.02	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
二ナトリウム EDTA、1 mM	0.11	0.07	0.06	0.04	0.03	0.03	0.02	0.02	0.02	0.02
塩酸、0.1%	0.11	0.02	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
リン酸、0.1%	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
トリエチルアミン、1%	2.33	2.42	2.50	2.45	2.37	1.96	0.50	0.12	0.04	<0.01
トリフルオロ酢酸、0.1%	1.20	0.78	0.54	0.34	0.22	0.06	<0.02	<0.01	n/a	n/a
バッファーおよび塩
酢酸アンモニウム、10 mM	1.88	0.94	0.53	0.29	0.15	0.02	<0.01	n/a	n/a	n/a
重炭酸アンモニウム、10 mM	0.41	0.10	0.01	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
HEPES、10 mM、pH 7.6	2.45	2.50	2.37	2.08	1.50	0.29	0.03	<0.01	n/a	n/a
MES、10 mM、pH 6.0	2.42	2.38	1.89	0.90	0.45	0.06	<0.01	n/a	n/a	n/a
リン酸カリウム、二塩基 (K₂HPO₄)、10 mM	0.53	0.16	0.05	0.01	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
リン酸カリウム、一塩基 (KH₂PO₄)、10 mM	0.03	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
酢酸ナトリウム、10 mM	1.85	0.96	0.52	0.30	0.15	0.03	<0.01	n/a	n/a	n/a
塩化ナトリウム、1 M	2.00	1.67	0.40	0.10	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
クエン酸ナトリウム、10 mM	2.48	2.84	2.31	2.02	1.49	0.54	0.12	0.03	0.02	0.01
ギ酸ナトリウム、10 mM	1.00	0.73	0.53	0.33	0.20	0.03	<0.01	n/a	n/a	n/a
リン酸ナトリウム、100 mM、pH 6.8	1.99	0.75	0.19	0.06	0.02	0.01	0.01	0.01	0.01	<0.01
トリス HCl、20 mM、pH 7.0	1.40	0.77	0.28	0.10	0.04	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a
トリス HCl、20 mM、pH 8.0	1.80	1.90	1.11	0.43	0.13	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a
界面活性剤
Brij 35、1%	0.06	0.03	0.02	0.02	0.02	0.01	<0.01	n/a	n/a	n/a
CHAPS、0.1%	2.40	2.32	1.48	0.80	0.40	0.08	0.04	0.02	0.02	0.01
ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート (Tween 20)、0.1%	0.21	0.14	0.11	0.10	0.09	0.06	0.05	0.04	0.04	0.03
ドデシル硫酸ナトリウム (SDS)、0.1%	0.02	0.01	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
Triton X-100、0.1%	2.48	2.50	2.43	2.42	2.37	2.37	0.50	0.25	0.67	1.42
Waters PIC 試薬
PIC A、1 バイアル/L	0.67	0.29	0.13	0.05	0.03	0.02	0.02	0.02	0.02	<0.01
PIC B6、1 バイアル/L	2.46	2.50	2.42	2.25	1.83	0.63	0.07	<0.01	n/a	n/a
PIC B6、低 UV、1 バイアル/L	0.01	<0.01	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a	n/a
PIC D4、1バイアル/L	0.03	0.03	0.03	0.03	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.01

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