Consultare la seguente tabella per ottenere le assorbanze a diverse lunghezze d'onda per le fasi mobili utilizzate di frequente.
Per ridurre il rumore di fondo, scegliere la fase mobile con attenzione.
La fase mobile ottimale per l'applicazione in uso non assorbe in corrispondenza delle lunghezze d'onda di rivelazione selezionate. Verificare con tale fase mobile che qualsiasi assorbanza sia dovuta soltanto al campione. L'assorbanza della fase mobile riduce inoltre l'intervallo dinamico lineare del rivelatore di una quantità pari all'assorbanza che viene sottratta dalla funzione di azzeramento automatico. Lunghezza d'onda, pH e concentrazione della fase mobile incidono sull'assorbanza della fase mobile. Nella tabella che segue sono riportati esempi di varie fasi mobili con valori di assorbanza basati su un cammino ottico di 10 mm.
Fase mobile | Assorbanza (AU) alla lunghezza d'onda specificata (nm) | |||||||||||||||
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200 | 205 | 210 | 215 | 220 | 230 | 240 | 250 | 260 | 280 | |||||||
Solventi | ||||||||||||||||
ACN | 0,05 | 0,03 | 0,02 | 0,01 | 0,01 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
IPA | 1,80 | 0,68 | 0,34 | 0,24 | 0,19 | 0,08 | 0,04 | 0,03 | 0,02 | 0,02 | ||||||
MeOH (degassificato) | 1,91 | 0,76 | 0,35 | 0,21 | 0,15 | 0,06 | 0,02 | < 0,01 | n/a | n/a | ||||||
MeOH (non degassificato) | 2,06 | 1,00 | 0,53 | 0,37 | 0,24 | 0,11 | 0,05 | 0,02 | < 0,01 | n/a | ||||||
THF non stabilizzato (fresco) | 2,44 | 2,57 | 2,31 | 1,80 | 1,54 | 0,94 | 0,42 | 0,21 | 0,09 | 0,05 | ||||||
THF non stabilizzato (vecchio) | > 2,5 | > 2,5 | > 2,5 | > 2,5 | > 2,5 | > 2,5 | > 2,5 | > 2,5 | 2,5 | 1,45 | ||||||
Acidi e basi | ||||||||||||||||
Acido acetico, 1% | 2,61 | 2,63 | 2,61 | 2,43 | 2,17 | 0,87 | 0,14 | 0,01 | < 0,01 | n/a | ||||||
Fosfato di diammonio, 50 mM | 1,85 | 0,67 | 0,15 | 0,02 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
EDTA disodico, 1 mM | 0,11 | 0,07 | 0,06 | 0,04 | 0,03 | 0,03 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | ||||||
Acido cloridrico, 0,1% | 0,11 | 0,02 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Acido fosforico, 0,1% | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Trietilammina, 1% | 2,33 | 2,42 | 2,50 | 2,45 | 2,37 | 1,96 | 0,50 | 0,12 | 0,04 | < 0,01 | ||||||
Acido trifluoroacetico, 0,1% | 1,20 | 0,78 | 0,54 | 0,34 | 0,22 | 0,06 | < 0,02 | < 0,01 | n/a | n/a | ||||||
Tamponi e sali | ||||||||||||||||
Acetato di ammonio, 10 mM | 1,88 | 0,94 | 0,53 | 0,29 | 0,15 | 0,02 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | ||||||
Bicarbonato di ammonio, 10 mM | 0,41 | 0,10 | 0,01 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
HEPES, 10 mM, pH 7,6 | 2,45 | 2,50 | 2,37 | 2,08 | 1,50 | 0,29 | 0,03 | < 0,01 | n/a | n/a | ||||||
MES, 10 mM, pH 6,0 | 2,42 | 2,38 | 1,89 | 0,90 | 0,45 | 0,06 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | ||||||
Fosfato di potassio, dibasico (K2HPO4), 10 mM | 0,53 | 0,16 | 0,05 | 0,01 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Fosfato di potassio, monobasico (KH2PO4), 10 mM | 0,03 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Acetato di sodio, 10 mM | 1,85 | 0,96 | 0,52 | 0,30 | 0,15 | 0,03 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | ||||||
Cloruro di sodio, 1 M | 2,00 | 1,67 | 0,40 | 0,10 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Citrato di sodio, 10 mM | 2,48 | 2,84 | 2,31 | 2,02 | 1,49 | 0,54 | 0,12 | 0,03 | 0,02 | 0,01 | ||||||
Formiato di sodio, 10 mM | 1,00 | 0,73 | 0,53 | 0,33 | 0.20 | 0,03 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | ||||||
Fosfato di sodio, 100 mM, pH 6,8 | 1,99 | 0,75 | 0,19 | 0,06 | 0,02 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 | < 0,01 | ||||||
Tris HCl, 20 mM, pH 7,0 | 1,40 | 0,77 | 0,28 | 0,10 | 0,04 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Tris HCl, 20 mM, pH 8,0 | 1,80 | 1,90 | 1,11 | 0,43 | 0,13 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Tensioattivi | ||||||||||||||||
Brij 35, 1% | 0,06 | 0,03 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,01 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | ||||||
CHAPS, 0,1% | 2,40 | 2,32 | 1,48 | 0,80 | 0,40 | 0,08 | 0,04 | 0,02 | 0,02 | 0,01 | ||||||
Poliossietilene sorbitano monolaurato (Tween 20), 0,1% | 0,21 | 0,14 | 0,11 | 0,10 | 0,09 | 0,06 | 0,05 | 0,04 | 0,04 | 0,03 | ||||||
Sodio dodecil solfato (SDS), 0,1% | 0,02 | 0,01 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
Triton X-100, 0,1% | 2,48 | 2,50 | 2,43 | 2,42 | 2,37 | 2,37 | 0,50 | 0,25 | 0,67 | 1,42 | ||||||
Reagenti Waters PIC | ||||||||||||||||
PIC A, 1 vial/L | 0,67 | 0,29 | 0,13 | 0,05 | 0,03 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | < 0,01 | ||||||
PIC B6, 1 vial/L | 2,46 | 2,50 | 2,42 | 2,25 | 1,83 | 0,63 | 0,07 | < 0,01 | n/a | n/a | ||||||
PIC B6, basso UV, 1 vial/L | 0,01 | < 0,01 | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | n/a | ||||||
PIC D4, 1 vial/L | 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,01 |
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