Consulte esta tabela para obter valores de corte aproximados do comprimento de onda para solventes, tampões, detergentes e fases móveis.
As concentrações de solvente representadas são as mais frequentemente utilizadas. Se quiser usar uma concentração diferente, é possível determinar a absorbância aproximada usando a lei de Beer, pois a absorbância é proporcional à concentração.
Observações:
- O corte λ (ou UV) é o comprimento de onda no qual a absorbância do solvente é igual a 1 AU.
- Operar em um comprimento de onda próximo ou abaixo do corte aumentará o ruído da linha de base devido à absorbância de solvente.
Tabela 1.
Cortes de comprimento de onda para várias fases móveis
| Fase móvel |
Corte λ (nm) |
| Ácido acético, 1% |
230 |
| Acetato de amônio, 10 mM |
205 |
| Bicarbonato de amônio, 10 mM |
190 |
| 3-[(3-Colamidopropil)-dimetilamônio]-1-propanossulfonato (CHAPS) 0,1% |
215 |
| Fosfato de diamônio, 50 mM |
205 |
| EDTA dissódico, 1 mM |
190 |
| Ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinoetanossulfônico (HEPES), 10 mM, pH 7,6 |
225 |
| Ácido clorídrico, 0,1% |
190 |
| Ácido 2-(N-morfolino)-etanossulfônico (MES), 10 mM, pH 6,0 |
215 |
| 4-octilfenol polietoxilato (Triton X-100), 0,1% |
240 |
| Polioxietileno (35) lauril éter (Brij 35), 0,1% |
190 |
| Fosfato de potássio, dibásico, 10 mM |
190 |
| Fosfato de potássio, monobásico, 10 mM |
190 |
| Acetato de sódio, 10 mM |
205 |
| Cloreto de sódio, 1 M |
207 |
| Citrato de sódio, 10 mM |
225 |
| Dodecilsulfato de sódio, 0,1% |
190 |
| Formiato de sódio, 10 mM |
200 |
| Trietilamina, 1% |
235 |
| Ácido trifluoroacético, 0,1% |
190 |
| Cloridrato de tris(hidroximetil)aminometano (Tris HCl), 20 mM, pH 7,0 |
202 |
| Tris HCl, 20 mM, pH 8,0 |
212 |
| Reagente A de cromatografia por par iônico (PIC, Paired-Ion Chromatography) da Waters, 1 ampola/litro |
200 |
| Reagente B-6 Waters PIC, 1 ampola/litro |
225 |
| Reagente B-6 Waters PIC, UV baixo, 1 ampola/litro |
190 |
| Reagente D-4 Waters PIC, 1 ampola/litro |
190 |
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Seleção de comprimento de onda
