Para reduzir o risco de excedente, siga estas diretrizes para solventes de lavagem.
Os solventes de lavagem limpam a agulha de amostra entre injeções e remove resíduos da amostra anterior. Normalmente, são mais fortes do que a fase móvel isocrática de uma aplicação e costumam ser tão ou mais fortes que as condições de fase móvel final para uma separação de gradiente. Como eles não são injetados em uma coluna, a determinação de um solvente de lavagem apropriado não requer, para fins práticos, considerações cromatográficas.
Para melhor desempenho, siga essas diretrizes ao selecionar solventes de lavagem. Do contrário, pode-se aumentar o risco de excedente. No entanto, essas diretrizes não proíbem todas as outras combinações de solvente, que podem ser executadas com expectativas de desempenho inferiores ou por meio da manipulação dos parâmetros de injeção.
Nota: Para evitar danificar e entupir os componentes no caminho do fluxo de lavagem e purga, a Waters não recomenda usar tampões ou aditivos não voláteis como solventes de lavagem.
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Importante: Os solventes de lavagem devem ser compatíveis e miscíveis, tanto com a fase móvel da aplicação quanto com os componentes da amostra. Eles também precisam ser totalmente solúveis na fase móvel e na amostra e não devem causar precipitação.
Use solventes de lavagem com base nas químicas da fase móvel e amostra da sua aplicação.
- Eles devem ser fortes o suficiente para dissolver facilmente a amostra e manter a solubilidade depois disso.
- Para condições de cromatografia de fase reversa aquosa tamponada, normalmente é utilizado um solvente de lavagem com uma alta concentração de solvente orgânico, como ACN ou MeOH entre 80 e 100% com o restante de água.
Nota: O titânio está sujeito à corrosão em metanol anidro, o que pode ser evitado adicionando uma pequena quantidade de água (aproximadamente 3%). É possível uma leve corrosão com amônia > 10%. Caso esteja usando um Alliance iS Bio HPLC System, como alternativa, é possível remover os ralos de filtro de titânio (o sistema perde a primeira linha de proteção contra partículas) ou substituí-los por ralos de aço inoxidável se a análise não for afetada por considerações de biocompatibilidade.
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