Pour réduire le risque de contamination inter-échantillons, respectez les recommandations relatives aux solvants de lavage.
Les solvants de lavage nettoient l’aiguille de prélèvement de l’échantillon entre les injections et éliminent les traces de l’échantillon précédent. Ils sont généralement plus forts que la phase mobile isocratique d’une application et souvent aussi forts, voire plus, que la phase mobile finale en cas de séparation par gradient. Comme ils ne doivent pas être injectés dans une colonne, toute considération chromatographique est donc inutile pour déterminer le solvant de lavage approprié, quelle que soit l’application pratique.
Pour des performances optimales, suivez les consignes ci-après lorsque vous sélectionnez les solvants de lavage. Le non-respect de ces recommandations peut augmenter le risque de contamination inter-échantillons. Toutefois, les directives n’interdisent pas toutes les autres combinaisons de solvants, mais celles-ci vous exposent à une perte de performances et à une modification des paramètres d’injection.
Remarque : Pour éviter d’endommager et d’obstruer des éléments du circuit fluidique de lavage et de purge, Waters recommande de ne pas utiliser des tampons non volatils ou des additifs comme solvants de lavage.
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Important : Les solvants de lavage doivent être compatibles et miscibles avec la phase mobile de l’application et les composés de l’échantillon. Ils doivent également être totalement solubles dans la phase mobile et l’échantillon, et ils ne doivent pas provoquer de précipitation.
Sélectionnez les solvants de lavage en fonction des chimies de l’échantillon et de la phase mobile de votre application.
- Les solvants de lavage doivent être suffisamment forts pour dissoudre facilement l’échantillon et maintenir la solubilité par la suite.
- Pour les applications de chromatographie en phase inverse aqueuse tamponnée, un solvant de lavage à forte concentration en solvant organique est généralement utilisé, comme une solution à 80-100 % d’ACN ou de MeOH avec le reste constitué d’eau.
Remarque : Le titane se corrode dans le méthanol anhydre. Vous pouvez éviter ce problème en ajoutant une petite quantité d’eau (environ 3 %). Une légère corrosion est possible avec de l’ammoniaque > 10 %. Si vous utilisez un Système Alliance iS Bio HPLC, vous pouvez retirer les plongeurs de filtre en titane (le système perd sa protection de première ligne contre les particules) ou les remplacer par des plongeurs en acier inoxydable si les facteurs de biocompatibilité n’affectent pas votre analyse.
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Recommandations relatives aux solvants
