Die Nichtbeachtung der angegebenen Richtlinien kann zu unerwünschter Verschleppung zwischen den Injektionen führen.
In einem chromatographischen System wird jede Substanz, die einen unerwünschten Peak oder übermäßiges Hintergrundrauschen verursacht, als Kontamination bezeichnet. Probenverschleppung ist eine besondere Form der Kontamination. Sie tritt auf, wenn Probenmaterial, das nach einer Injektion im System verblieben ist, als Peaks in nachfolgenden Injektionen auftaucht und die Quantifizierung stört. Zur Optimierung der Systemleistung muss die Probenverschleppung minimiert und auf einem akzeptablen Niveau gehalten werden (oft unterhalb der Nachweisgrenze).
Hinweis: Verschleppung kann durch Säulenwechselwirkungen oder im System auftreten. Sie können eine Säulenverschleppung identifizieren, indem Sie einen Doppelgradienten auf der Säule durchführen. Wenn im zweiten Gradienten Verschleppung beobachtet wird, empfiehlt Waters, die Säule in einem starken Lösungsmittel zu waschen.
Gründe für Probenverschleppung sind beispielsweise Fehler beim Einbau von Flüssigkeitsleitungen, Fittings oder anderem Zubehör oder unwirksame Waschlösungsmittel. Mit den folgenden Maßnahmen können Sie die Probenverschleppung verringern:
- Verwenden Sie jede Erweiterungsschleife nur in einem System.
- Achten Sie darauf, dass alle Leitungsverbindungen ordnungsgemäß sitzen. Bevor Sie die Kompressionsschrauben des Fittings anziehen, müssen die Schläuche richtig (ohne Abstand innerhalb des Ports) in allen Anschlussports sitzen. Schlecht sitzende Verbindungen bilden unnötige Volumenreservoirs, in denen Probenmaterial zurückbleiben kann, was die Probenverschleppung verstärkt. (siehe Vermeiden von Lecks.)
- Überprüfen Sie die Nadelführung auf Probenreste und Verschmutzungen, die zu Verschleppungen führen könnten. Falls erforderlich, reinigen Sie die Nadelführung oder tauschen Sie sie aus.
- Vermeiden Sie Verschlusssysteme für Platten oder Vials, die mit klebrigen Substanzen arbeiten, da diese zu Probenverschleppung führen können.
- Falls Sie Interaktionen der Probe mit dem Nadelmaterial vermuten, erhöhen Sie die Stärke des Waschlösungsmittels oder die Waschdauer.
- Befolgen Sie bei der Auswahl von Waschlösungsmitteln diese Richtlinien für Waschlösungsmittel.
Siehe auch: Weitere Informationen zur Vermeidung von Kontaminationen in Chromatographiesystemen finden Sie im Dokument
Controlling Contamination in LC/MS Systems (Vermeiden von Kontaminationen in LC-MS-Systemen, 715001307DE) auf der Website von Waters (
www.waters.com).